Informatii generale: Profil integrat infertilitate – tipaj HLA-C si genotipare KIR
Pe tot parcursul primului trimestru de sarcină, începând cu nidația (procesul de implantare embrionară la nivelul peretelui uterin) interfață materno-fetală imunologică este reprezentată în proporție de 70% de celulele NK uterine(uNK)- celule Natural killer. Acestea se găsesc într-o interacțiune continuă cu celulele fetale trofoblastice extraviloase (EVTs) în vederea invadării trofoblastului și dezvoltării armonioase a placentei. Celulele uNK au că efect stimularea angiogenezei și promovarea remodelării arterelor spirale uterine, îmbunătățind astfel invadarea trofoblastica a peretelui uterin.
Legătură materno-fetală este realizată prin acest contact direct al celulelor uNK-materne și EVTs-fetale, iar evaluarea la nivel molecular urmărește interacțiunea dintre receptorii de tip KIR (materni) și liganzii acestora (antigene) de tip tip HLA-C fetale.
Receptorii KIR (Killer Immunoglobulin-like Receptor) relevanți sunt clasificați în două tipuri, activatori sau inhibitori ai celulelor de tip uNK, după cuplarea cu antigenele tip HLA-C. Au fost descrise clasic două haplotipuri generale ale acestui tip de receptori KIR- A și B.
Viitoarea mama, cu două gene alele pentru genele KIR, va prezenta două haplotipuri. Fătul va fi purtătorul a două gene alele HLA-C, una maternă și una paternă. În funcție de secvență ADN și modul de interacțiune cu diverși receptori KIR, aceste gene alele HLA-C au fost împărțite clasic în două tipuri- C1 și C2.
Cele două tipuri de molecule, respectiv KIR și HLA-C sunt codate de 2 dintre cele mai polimorfice gene ale genomului uman, analizele uzuale genotipând doar marile grupe de receptori KIR și epitopi HLA-C, prezentate mai sus. În cadrul bazei de date a alelelor cunoscute tip KIR și HLA-C sunt raportate un număr de 1632 de gene alele KIR și 8036, HLA-C. Se poate astfel afirmă deci, că la nivel molecular, fiecare sarcina este unică.
În literatură au fost raportate diverse combinații la nivel genotipic, cu risc pentru evoluția fiziologică a sarcinii, respectiv risc pentru avort recurent, eșuarea implantării, preeclampsie. În mod uzual, genotiparea KIR-HLAC se realizează prin analiza ADN-ului celor doi parteneri.
Condiții de recoltare:
Pregătire pacient – nu este necesară o pregătire specială.
Specimen recoltat – sânge venos.
Recipient de recoltare – vacutainer cu anticoagulant de tip EDTA .
Cauze de respingere a probei – folosirea heparinei că anticoagulant; probe coagulate sau hemolizate; probe refrigerate sau congelate.
Stabilitate probă – 7 zile la 2-8ºC.
Metodă de testare: genotipare HLA-C prin secventiere genotipare KIR prin tehnică PCR cu oligonucleotide specific secvenței țintă (sequence-specific oligonucleotide – PCR SSO).
Indicații de testare Profil integrat infertilitate – tipaj HLA-C si genotipare KIR
- pierderi recurente de sarcină, fără o etiologie certă;
- istoric matern de pre-eclampsie;
- proceduri de FIV eșuate în mod repetat;
- decizia de alegere a numărului optim de embrioni pentru transfer;
- alegerea unui donator compatibil cu viitoarea mamă, atât în cazul donării de spermatozoizi, cât și în cazul donării de ovocite.
În general, se recomandă consult genetic pentru confirmare tipului de testare genetică cel mai adecvat și pentru studiul asocierii dintre genotipul matern și cel al tatălui, cu influență directă asupra genotipului HLA-C fetal.
Interpretarea rezultatelor
În funcție de subtipul de antigen fetal (HLA-C) și genotipul matern KIR, evaluare riscului de intoleranță imunologică materno-fetală va fi documentată astfel :
Recomandări post-testare
Când combinația dintre KIR matern și HLA-C ale unor embrioni este incompatibilă, se recomandă:
- Transferul unui singur embrion pentru a evita expunerea mamei la o încărcătură dublă de HLA-C incompatibil.
- Tratament imunomodulator ce poate fi prescris și viitoarei mame pentru a crește toleranța imunologică versus embrion.
- În cazurile cu donator de ovocite sau spermă, studiul genotipul HLA-C al donatorului și al KIR matern este recomandată pentru a confirmă/infirmă riscul de incompatibilitate materno-fetală.
Limitările metodei:
Interpretarea rezultatelor se face conform informațiilor aflate în vigoare, de aceea dacă va există o așa-zisă „ïncompatibilitate” nu se poate confirmă cert că eșecul obținerii unei sarcini sau pierderea sarcinilor, sunt determinate exclusiv datorită unei incompatibilități imunologice KIR-HLA. Sunt necesare studii extensive cu privire la acest domeniu, neexistând un consens internațional cu privire la recomandările de testare și interpretarea rezultatelor.
Bibliografie:
- 1. Moffet A, Colucci F. J Clin Inves. 2014; 124 (5): 1872-1879, https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24789879/
- Alecsandru D y col. Hum Reprod. Dec 2014; 29(12): 2637-43.
- Alecsandru D, García-Velasco JÂ. Fertil Steril. 2017 iunie; 107(6): 1273-1278.
- Morin SJ y col. Fertil Steril. martie 2017; 107(3): 677-683.e2.
- Moffet A, Hiby SE. Placentă. 2007; 28 (Supp. A): S51-6
