Testare imunohistochimică (IHC) - FOLR-1

Informații generale: Testare imunohistochimică (IHC) - FOLR-1

Context clinic

Cancerul ovarian epitelial (EOC) constituie cea mai agresivă și letală formă de neoplazie ginecologică, fiind asociat cu un impact clinic major din cauza posibilităților terapeutice limitate. În cele mai multe cazuri, pacientele sunt diagnosticate în stadii avansate ale bolii, ceea ce contribuie semnificativ la prognosticul nefavorabil. Deși terapiile de primă linie au înregistrat progrese considerabile, până la 80% dintre pacientele cu EOC avansat dezvoltă recidivă în timpul sau după administrarea chimioterapiei pe bază de compuși ai platinei.

Proteina receptorului pentru folat 1 (FOLR1), cunoscută și sub denumirea de receptor de folat alfa (FRα), este exprimată în aproximativ 90% dintre carcinoamele ovariene și reprezintă un biomarker predictiv pentru terapia direcționată împotriva FOLR1 în cancerul ovarian epitelial.

FOLR1 face parte din familia receptorilor de folat, are o expresie crescută în diverse tumori de origine epitelială (cancerul endometrial, cancerul pulmonar non-small cell, cancerul renal cu celule clare, în anumite forme de cancer mamar, inclusiv cancerul primar al trompelor uterine și cancerul peritoneal primar), dar cu o expresie limitată în celulele epiteliale normale.

Deși cancerele ovariene exprimă în exces FRα, s-au observat variații ale nivelului de expresie în funcție de histotipul tumoral. FRα este o glicoproteină ancorată la suprafața celulară printr-un rest glicozilfosfatidilinozitol (GPI), codificată de gena FOLR1. Acest receptor se leagă cu afinitate ridicată de acidul folic și derivații săi reduși și transportă 5-metiltetrahidrofolatul în celule, fiind implicat în numeroase procese, precum diviziunea celulară, proliferarea și creșterea tisulară, prin activarea unor cascade de semnalizare și participarea la ciclul folatului.

De asemenea, FRα poate fi eliberat de celulele tumorale și detectat în circulație sub formă solubilă (sFRα). Având în vedere expresia ridicată a acestui receptor în cancerul ovarian și posibilitatea determinării sale serice, sFRα ar putea reprezenta un biomarker clinic suplimentar valoros în diagnosticul și monitorizarea acestei boli. FOLR1 facilitează transportul activ al folatului în celulă, participând la transferul unei unități de carbon necesare în biosinteza de novo a purinelor și timidilatului, procese esențiale pentru sinteza ADN-ului, ARN-ului și a cofactorilor enzimatici. În context tumoral, cerințele metabolice sunt semnificativ crescute din cauza ratei ridicate de proliferare celulară, ceea ce determină o necesitate sporită de folat, timidilat și purine în comparație cu țesuturile normale.

Această dependență sporită a celulelor tumorale de folat oferă o oportunitate terapeutică, exploatată de strategiile de tratament antineoplazic anti-folat (ex. utilizarea de conjugate folat-medicament sau inhibitori ai metabolismului acidului folic). Studiile au demonstrat o corelație pozitivă între expresia FOLR1 și stadiul clinic sau gradul histologic tumoral, sugerând că acest receptor poate conferi un avantaj proliferativ prin intensificarea aportului de folat sau prin activarea unor căi de semnalizare intracelulară asociate supraviețuirii celulare și angiogenezei.

Un procent de 35% din pacienții cu cancer ovarian epitelial (EOC), rezistent la medicamentele ce conțin platină, pot fi eligibili pentru terapia țintită anti-Receptor Folat alfa (anti-FRalfa/anti-FOLR1) – ELAHERE (mirvetuximab- soravtansine).

Metoda de lucru: Testul imunohistochimic VENTANA FOLR1 (FOLR1-2.1) este indicat ca test de diagnostic companion, în identificarea pacienților cu tumori epiteliale maligne primare, pozitive pentru receptorul de folat care pot beneficia de terapia țintită anti-receptor folat alfa (anti-FOLR1), și anume:

• Carcinomul ovarian primar*
• Carcinomul de trompă uterină*
• Carcinomul peritoneal*

*Carcinomul seros de grad înalt, carcinomul seros de grad redus, carcinomul endometrioid, carcinomul cu celule clare și carcinomul mucinos. Testul imunohistochimic se efectueză în cadrul unui sistem complet automat, utilizând sistemul BenchMark ULTRA (Ventana), cu respectarea protocoalelor recomandate de producător. Anticorpul VENTANA anti-FOLR1 se leagă în mod specific de receptorul FOLR1 din secțiunile de țesut fixate în formol, încorporate în parafină (FFPE). Anticorpul poate fi localizat folosind un anticorp secundar haptenat urmat de un conjugat multimer anti-hapten-HRP (OptiView DAB IHC Detection Kit).

Specimen recoltat-tipuri*:

• fragmente tisulare tumorale (minim 100 celule tumorale viabile; tumora primară și/ sau localizările metastatice), recoltate în cursul interventiilor chirurgicale, microchirurgicale sau biopsice, fixate ulterior în formol 10%, histoprocesate și incluse în parafină (blocuri de parafină);
• țesut inclus în blocuri de parafină; *specimene excluse: preparate citologice și metastaze osoase decalcifiate.

Recipient de recoltare:

• recipiente cu formol tamponat 10% (adaptate pentru dimensiunile fragmentelor tisulare recoltate, în raport minim 1:1).

Stabilitate probă

• 12-72 ore pentru fragmentele tisulare fixate în formol 10%;
• biopsiile mici necesită fixare în formol 10% minim 6 ore;
• timp îndelungat, în mediu ambiental, protejate de umezeală și radiațiile solare, pentru blocurile de parafină.

Interpretarea rezultatelor: Rezultatul IHC al colorației IHC cu anticorpi VENTANA anti-FOLR1 (clona FOLR1-2.1) este interpretat de un patolog instruit, pe baza evaluării intensității expresiei membranare în celulele tumorale (minim 100 celule tumorale viabile) pentru VENTANA anti-FOLR1 (FOLR1-2.1) - scor 0, scor 1+, scor 2+ și scor 3+, ulterior folosirea sistemului de scor binar reproductibil: pozitiv sau negativ pentru statusul FOLR1.

• Un rezultat/status FOLR1 pozitiv este atribuit cazurilor cu: ≥ 75% din celulele tumorale viabile prezintă expresie membranară moderată (2+) și/sau expresie membranară crescută (3+).
• Un rezultat/status FOLR1 negativ este atribuit cazurilor cu: < 75% din celulele tumorale viabile prezintă expresie membranară moderată (2+) și/sau expresie membranară crescută (3+).

Scor IHC analizat : intensitatea expresiei membranare celulare

A. Status FOLR1 negativ:

B. Status FOLR1 pozitiv:

Referinte:

1. Sudimack J, Lee RJ. Targeted drug delivery via the folate receptor. Adv Drug Deliv Rev. 2000, 41:147-62.

2. Kelemen LE. The role of folate receptor α in cancer development, progression and treatment: cause, consequence or innocent bystander? Int J Cancer. 2006,119:243-50.

3. Jelovac D, Armstrong D. Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer. CA Cancer J Clin. 2011, 61(3): 183-203.

4. Elnakat H., Ratnam M. Distribution, functionality and gene regulation of folate receptor isoforms: implications in targeted therapy. Advanced Drug Delivery Reviews. 2004; 56(8): 1067-1084.

5. Hilgenbrink A., Low P. Folate receptor-mediated drug targeting: From Therapeutics to diagnostics. Journal of Pharmaceutical Sciences. 2005;94(10): 2135-2146.

6. du Bois A, Herrstedt J, Hardy-Bessard AC, et al. Phase III trial of carboplatin plus paclitaxel with or without gemcitabine in first-line treatment of epithelial ovarian cancer. Journal of Clinical Oncology Clin Oncol. 2010;28(27):4162–4169.

7. Lopez-Guerrero J.A, Romero I., Poveda A. Trabectedin therapy as an emerging treatment strategy for recurrent platinum-sensitive ovarian cancer. Chin J Cancer. 2015. 34:41-49.

8. Hanker LC, Loibl S, Burchardi N. The impact of second to sixth line therapy on survival of relapsed ovarian cancer after primary taxane/platinum-based therapy. Ann Oncol. 2012. 10:2605-2612.

9. FOLR1 Pathologist Training Disease Background and Assay Overview Ventana, 2025.

Vezi tot conținutul

Vezi mai puțin