Informații generale – Test Coombs indirect
Identificarea de antiglobuline (imunoglobuline), cunoscută și sub denumirea de test Coombs, este o procedură imunologică de laborator, utilizată pentru a detecta prezența anticorpilor indreptați împotriva globulelor roșii circulante (RBC) din sânge, care vor induce hemolizarea acestora. Distrugerea globulelor roșii (eritrocite- RBC) de către anticorpii direcționați împotriva lor, este diagnosticată ca anemie hemolitică autoimună (AIHA). O serie de alte etiologii pot fi încadrate, însă în această clasificare1,2.
Determinarea antiglobulinelor poate fi realizată prin evidențierea celor directe (DAT) sau prin evidențierea celor indirecte (IAT). Principiul DAT este acela de a detecta prezența anticorpilor (Ig) atașați direct la RBC, fapt care se evidențiază prin spălarea unei probe de sânge, recoltată în soluție salină, cu scopul izolării eritrocitelor expuse, ale pacientului; această procedură îndepărtează anticorpii nelegați, fapt care ar putea afecta rezultatul obținut.
IAT este utilizată pentru a detecta anticorpi nelegați de RBC, care pot fi prezenți în serul pacientului. În testul direct, un reactiv monospecific sau polispecific este apoi adăugat la RBC spălate pentru a detecta IgG și/sau complement C3 legat. În practică, multe laboratoare vor folosi mai întâi un reactiv polispecific, care poate detecta atât IgG, cât și fracțiunea C3 a complementului; un rezultat pozitiv va fi apoi urmat de testare monospecifică, pentru a caracteriza în continuare anticorpul.
În cazul tesului indirect, este utilizat serul dintr-o probă de sânge și eritrocitele native sunt îndepărtate. Proba de ser izolată este apoi incubată cu eritrocite străine, cu antigenicitate cunoscută. Se adaugă apoi reactiv de tip antiglobulină, apariția aglutinarii indicând un rezultat pozitiv1-3.
Testul Coombs, recomandat atunci când există suspiciunea unui proces autoimun îndreptat impotriva celulelor roșii din sânge, este utilizat și pentru a realiza un diagnostic diferențial, inclusiv cu anemia hemolitică (la cald și la rece)3,4.
Recomandări pentru determinarea testului Coombs indirect
Testarea antiglobulinei devine utilă în cazul următoarelor situații1:
- Anemia hemolitică autoimună
- Anemia hemolitică imună indusă de medicamente
- Reacție hemolitică la transfuzia de sange, mediate de aloanticorpi
- Boala hemolitică a nou-născutului
- Lupus eritematos sistemic (fără anemie hemolitică)
Pregătire pacient – nu este necesară o pregătire prealabilă
Specimen recoltat – sânge venos5
Recipient de recoltare – vacutainer fără gel separator (capac roșu)
Cantitate recoltată – cât permite vacuumul
Prelucrare necesară după recoltare – se separă serul prin centrifugare timp de 10 minute la 1500 g, apoi se transferă în recipientul de transfer.
Volum probă – minimum 1 mL5
Cauze de respingere a probei5
- Specimen hemolizat
- Specimen contaminat
Stabilitate probă – serul separat este stabil 48 ore la 2-8°C sau o lună la – 20 grade C
Metodă – aglutinare/ gel filtrare5
Valori de referință Test Coombs indirect
Negativ
Bibliografie
- Theis SR, Hashmi MF. Coombs Test. [Updated 2021 Sep 16]. In: StatPearls [Internet]. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; 2022 Jan-. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK547707/
- Arndt, P., Garratty, G., Isaak, E., Bolger, M., & Lu, Q. (2009). Positive direct and indirect antiglobulin tests associated with oxaliplatin can be due to drug antibody and/or drug-induced nonimmunologic protein adsorption. Transfusion, 49(4), 711–718. https://doi.org/10.1111/j.1537-2995.2008.02028.x
- Matthews, J., & Newton, S. (2010). The Coombs test. Clinical journal of oncology nursing, 14(2), 143–145. https://doi.org/10.1188/10.CJON.143-145
- LabCorp Tests. Antibody Screen [on-line]: https://www.labcorp.com/tests/006015/antibody-screen (Accesat la data de 31.03.2022)
- Xu, L., Li, H., Yang, S., Zeng, W., Gan, S., Chen, X., Duan, L., & Hu, H. (2020). Interference in the indirect antiglobulin test and direct antiglobulin test from rheumatoid factor. The Journal of international medical research, 48(3), 300060519892386. https://doi.org/10.1177/0300060519892386