Test de transformare limfoblastica (LTT) – alimente (TOP 25)

Această analiză se poate recolta doar în anumite centre Synevo, conform unui program special, din cauza stabilității reduse a probei recoltate:

• Alba Iulia: recoltarea se efectuează în prima și ultima zi de marți din lună în Centrul de recoltare Alba Iulia (B-dul Revoluției 1989, nr. 47, bl. CF 1, parter), în intervalul orar 09:00 – 10:00, cu programare telefonică (0757.112.409/ 0258.701.544).
• Alexandria: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Alexandria (Str. Libertății, bl. K3), în intervalul orar 11:00 – 12:00.
• Arad: recoltarea se efectuează în zilele de luni Centrul de recoltare Banu Mărăcine (Str. Banu Maracine, nr. 24, bl.1/A, sc. D, parter) și Centrul de recoltare Revoluției (B-dul Revoluției, nr. 90, Sc. A, Ap. 14), în intervalul orar 11:30 – 12:30, Centrul de recoltare Aurel Vlaicu (Calea Aurel Vlaicu, bl. Z28, sc. D, parter, ap.25C), în intervalul orar 11:30 – 12:00 și în Laborator și centru de recoltare Arad (Str. Lt. Mj. Duma, nr.1, Bl. 338, Sc. A, Ap. 21, Parter), în intervalul orar: 11:30 – 13:00.
• Baia Mare: recoltarea se efectuează în cea de-a doua zi de marți a lunii în curs în Centrul de recoltare Unirii (Bulevardul Unirii, Nr. 18, in incinta clinicii Vista Vision), în intervalul orar 07:00 -08:00.
• Brăila: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Dorobanților (B-dul Dorobantilor, nr 5, Bl. A5, Parter), în intervalul orar 07:00 -08:00, cu programare telefonică.
• Brașov: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Laborator și centru de recoltare Aurel Vlaicu (Str. Aurel Vlaicu nr. 2), în intervalul orar 10:00 – 11:00, cu programare telefonică (0268 424 072/ 073).
• București & Ilfov: recoltarea se efectuează în baza unei programări telefonice în call center (021 9666) în zilele de marți, în intervalul orar 11:30 – 13:00 în Laborator și centru de recoltare Iancu de Hunedoara ( B-dul Iancu de Hunedoara, nr. 29F) și Centrul de recoltare Ștefan cel Mare (Șos. Ștefan cel Mare, nr. 56, bl. 38, parter), precum și în Laborator și centru de recoltare Chiajna (Str. Industriilor, nr. 25, Chiajna, Ilfov) în intervalul orar 11.00 – 14.00.
  • În zilele de miercuri, în intervalul orar 11:30 – 13:00 în Centrul de recoltare Plevnei (Calea Plevnei nr. 96, Sector 1) și în Laborator și centru de recoltare Chiajna (Str. Industriilor, nr. 25, Chiajna, Ilfov) în intervalul orar 11.00 – 14.00.
• Buzău: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Marghiloman (Str. Al. Marghiloman, Cartier Bazar – Obor, bl. 2B, parter), în intervalul orar 12:00 – 14:00.
• Cluj: recoltarea se efectuează în oricare centru de recoltare din Cluj , în zilele de marți, în intervalul orar 10:00 – 11:30, fără o programare efectuată în prealabil.
• Constanța: recoltarea se efectuează în prima zi de marți din lună în Centrul de recoltare Policlinica nr. 1 (B-dul Tomis, Nr. 145 – în incinta Policlinicii Nr. 1.) și Laborator și centru de recoltare Constanța (Bd. Tomis nr. 145, în incinta Spitalului județean), în intervalul orar 11:00 – 12:00.
• Craiova: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Laborator și centru de recoltare Craiova (Str. Alexandru Macedonski nr. 53, corp C2), în intervalul orar 07:30 – 09:00, cu programare telefonică la numerele de telefon 0251.530.040/ 0251.532.299.
• Deva: recoltarea se efectuează în prima și ultima zi de marți din lună în Centrul de recoltare Deva (Bd. 1 Decembrie nr. 2, bl. 4, parter), în intervalul orar 09:00 – 10:00, cu programare telefonică (‪0751 126 077/ 0254 262 112).
• Focșani: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Focșani (Bd-ul Brăilei, nr. 9), în intervalul orar 10:00 – 11:30, cu programare telefonică (‪0743 161 401).
• Hunedoara: recoltarea se efectuează în prima și ultima zi de marți din lună în Centrul de recoltare Hunedoara (Str. Mihai Viteazu, nr. 5, bl. W, sc. C, ap. 38, Mun. Hunedoara), în intervalul orar 08:00 – 09:00, cu programare telefonică (0755 058 617).
• Galați: recoltarea se efectuează  în zilele de marți în Laborator și centru de recoltare Galați (B-dul George Cosbuc nr. 251, Bl. Italian Residence), în intervalul orar 07:30 -08:30, cu programare telefonică (0236455671)
• Giurgiu: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Giurgiu (Str. Nicolae Bălcescu, bl. V32), în intervalul orar 10:30 – 11:30.
• Oradea: recoltarea se efectuează în zilele de luni în Laborator și centru de recoltare Coposu (Str. Corneliu Coposu, nr. 2), Centrul de recoltare Magheru (Bulevardul Magheru, nr. 8, bl. M8, parter) și Centrul de recoltare Decebal (B-dul. Decebal, nr. 22, bl. c104/b), în intervalul orar 10:00 – 11:00.
• Pitești: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Centrul de recoltare Victor Babeș (Str. Dr. Victor Babeș, nr.12), în intervalul orar 13:00 – 14:00.
• Ploiești: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Gheorghe Doja (Str. Ion Maiorescu, FN, Bloc 33 N1, parter – vis-a-vis de sediul BCR Ploiești), în intervalul orar 11:00 – 13:00.
• Râmnicu Vâlcea: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Râmnicu Vâlcea 1 (Calea lui Traian nr. 183, bl. 15, parter), în intervalul orar 12:00 – 13:00 și Centrul de recoltare Râmnicu Vâlcea 2 (B-dul Tineretului, nr. 3, bl A11/3, parter), în intervalul orar 11:00 – 12:00.
• Satu Mare: recoltarea se efectuează în cea de-a doua zi de  marți a lunii în curs în Laborator și centru de recoltare Satu Mare (Str. Prahova, nr.22),  în intervalul orar 07:00 -08:00.
• Sibiu: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Laborator și centru de recoltare Sibiu (Calea Dumbrăvii, nr. 17), se efectuează în Laborator și centru de recoltare Sibiu (Calea Dumbrăvii, nr. 17), în intervalul orar 10:00 – 11:00, cu programare telefonică (0269 243 361/ 0741 215 858)
• Târgoviște: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Târgoviște (Str. Col. Dumitru Băltărețu nr. 70, parter), în intervalul orar 10:00 – 12:00
• Tecuci: recoltarea se efectuează în zilele de marți în Centrul de recoltare Tecuci (Str. 1 Decembrie 1918, nr. 68), în intervalul orar 07:00 – 09:00, cu programare telefonică 0756 067 500.
• Timișoara: recoltarea se efectuează în zilele de luni în Laborator și centru de recoltare Timișoara (Str. Simion Bărnuţiu, nr. 21), în intervalul orar 11:00 – 13:00 și în Centrul de recoltare Tudor Vladimirescu (Splaiul Tudor Vladimirescu, Nr. 10, Demisol), în intervalul orar 11:00 – 13:00.
• Zalău: recoltarea se efectuează  în ultima zi de luni a lunii în curs în Centrul de recoltare Zalău (B-dul Mihai Viteazul, nr. 14, Bl O1, parter), în intervalul orar 07:00 -08:00.

Test de transformare limfoblastica (LTT) – alimente (TOP 25)

Hipersensibilizarile alimentare au crescut substantial in ultimii 20 ani. Frecventa lor in populatia europeana  variaza intre 8 si 18%.

Alergia alimentara clasica este o reactie de tip I, mediata de anticorpi IgE specifici. Totusi, mai ales la adulti, apar si alte reactii imunologice care nu sunt IgE-dependente si care sunt responsabile, dupa unii autori, de pana la 50% din cazuri.

Reactiile clinice de tip intarziat (alergie de tip IV) cresc odata cu varsta.

O alergie de tip IV este suspectata in urmatoarele situatii:

• reactia apare dupa 24-48 ore de la ingestia unui aliment si dureaza cateva zile sau chiar mai mult;
• tabloul clinic include in principal modificari cutanate eczematoase, tulburari gastrointestinale, migrene, mialgii si artralgii.

LTT este un instrument diagnostic pentru sensibilizarile de tip IV fata de alimente, stabilit si validat ca metoda moderna de laborator. Este folosit mai ales atunci cand testarea IgE specifice nu a dus la descoperirea alimentului responsabil.

Modificarile aduse LTT din 2002 au dus la cresterea specificitatii si sensibilitatii si testul a fost acreditat in Germania de DACH (Deutsche Akkreditierungsstelle Chemie GmbH)².

Deoarece prezenta unor contaminanti cum ar fi endotoxinele in fractiunile proteice din alimente afecteaza specificitatea testului (pot aparea rezultate fals-pozitive) extractele alergenice alimentare sunt supuse in prealabil unui proces de “detoxifiere”, in vederea eliminarilor pirogenilor¹.

In urma unui studiu care a inclus 355 pacienti cu simptome alergice tipice declansate la > 2 ore de la ingestia de alimente si cu IgE specifice negative, la care s-a efectuat  LTT optimizat fata de 44 alergeni alimentari obisnuiti, s-a constatat ca 40% dintre pacienti au prezentat un rezultat pozitiv fata de cel putin unul din alergenii testati.

Evitarea alergenilor alimentari la care s-a constatat sensibilizare prin LTT a condus la o imbunatatire clinica semnificativa la 89% dintre pacienti; in plus, la cei 10 pacienti la care s-a administrat budenozide (un glucocorticoid antiinflamator utilizat in tratamentul alergiilor) evolutia clinica a fost spectaculoasa.

Rezultatele au fost comparate cu cele obtinute pe un lot martor. Proportia mare de reactii unice la pacienti indica o proliferare limfocitara specifica unui aliment. Mai mult, specificitatea testului LTT a fost demonstrata prin numarul redus de rezultate pozitive obtinute la voluntarii sanatosi si prin raspunsul clinic excelent la evitarea alergenilor. Concluzia a fost ca LTT optimizat constituie o investigatie utila, cost-eficienta si neinvaziva pentru pacientii suspectati de hipersensibilitate alimentara de tip intarziat³.

Specimen recoltat – sange venos². 

Recipient de recoltare – vacutainer cu heparinat de litiu; vacutainer fara anticoagulant cu gel activator².

Volum proba – 20 mL sange heparinat si 5 mL ser².

Stabilitate proba – sangele trebuie sa ajunga in maxim 24 ore la laboratorul la care se efectueaza testul si in aceasta perioada se pastreaza la temperatura camerei; este contraindicata refrigerarea probei².

Cauze de respingere a probei – specimene care au depasit intervalul de stabilitate, probe refrigerate sau congelate².

Metoda – incorporarea unui nucleozid radioactiv (timidina) in ADN-ul celular².

Test de transformare limfoblastica (LTT) – alimente (TOP25)

Testeaza individual 25 alimente implicate cel mai frecvent in alergiile de tip IV: lapte de vaca, ou, carne de porc, carne de pui, carne de vita, ton, cod, grau, alac, porumb, secara, drojdie, alune, arahide, cartof, morcov, rosie, telina, spanac, mar, piersica, portocala, kiwi, piper, boia².

Interpretarea rezultatelor

1. Rezultat negativ

SI < 2 = nu exista sensibilizare de tip IV fata de alimentele testate.

2. Rezultat pozitiv

SI cuprins intre 2 si 3: rezultat inalt sugestiv pentru o reactie pozitiva;

SI>3: rezultat net pozitiv.

3. Rezultat neconcludent

Apare in situatia in care nu s-au obtinut criteriile de validare fie a controlului pozitiv (lipsa de activare policlonala a limfocitelor), fie a controlului negativ (proliferare spontana  crescuta). In conditiile in care recoltarea si transportul probei s-au efectuat in conditii adecvate, lipsa de validare a testului se poate datora:

• tratamentului prelungit cu imunosupresoare;
• proliferarii spontane crescute ca urmare a unei hiperactivitati a sistemului imun².

Limite si interferente

Un rezultat pozitiv evidentiaza prezenta unui numar crescut de celule T cu memorie alergen-specifice, indicand sensibilizarea limfocitelor si predispozitia catre reactiile alergice, fara ca aceasta sa conduca in mod necesar la manifestari clinice. Pe de alta parte, un rezultat negativ nu exclude sensibilizarea la un aliment^1;2.

Bibliografie

 1. Harald Renz et al. Leitlinie der Deutschen Gesellschaft für Allergologie und klinische Immunologie (DGAKI) unter Beteiligung des Arztverbandes Deutscher Allergologen (ÄDA), der Gesellschaft für Pädiatrische Allergologie und Umweltmedizin (GPA) und der Deutschen Dermatologische Gesellschaft (DDG). In Allergo J 2010; 19:110-128.

2. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.

3. Peter Janetschek, W. Mayer, Volker V. Baehr, F. Tiller. Food allergy type IV (delayed type) diagnosis in vitro by optimized lymphocyte proliferation test (LPT) + first experience with budenoside as therapy. In Gastroenterology, vol.124, supplement 1, April 2003.